A pepstatina é um pentapeptídeo, um inibidor natural da aspartil protease, que pode inibir a protease aspártica e a protease ácida de vários microrganismos.A pepstatina é secretada principalmente por espécies de Streptomyces e produzida por Streptomyces.Pode inibir a pepsina, a pepsina D e a enzima liberadora de angiotensina e tem efeitos terapêuticos na úlcera gástrica, hipertensão renal, artrite, edema de carragenina e outras doenças.
A pepstatina é um forte inibidor de aspartil proteases, como pepsina, catepsina D e renina.Este pentapeptídeo natural isolado de actinomicetos foi durante muitos anos o inibidor clássico da renina in vitro. A pepstatina não é específica para a renina e é pouco solúvel em água.Os derivados estruturais da pepstatina aumentaram sua solubilidade e especificidade para a renina em várias ordens de grandeza. A pepstatina contém o incomum γ aminoácido estatina que pode substituir os dois aminoácidos na ligação cindível do substrato protéico e bloquear a clivagem do substrato devido à analogia estrutural para um estado de transição da hidrólise da ligação peptídica por aspartil proteases.
Quando a proteína é extraída de células quebradas, podem ser liberadas proteases, que precisam ser rapidamente inibidas para evitar que a proteína seja degradada.No processo de extração de proteínas, é necessário adicionar inibidores de protease para prevenir a proteólise.Inibidor de protease refere-se amplamente a uma substância que se liga a alguns grupos no centro ativo das moléculas de protease, de modo que a atividade da protease diminui ou mesmo desaparece, mas não desnatura a proteína enzimática.A sensibilidade de várias proteases a diferentes proteínas é diferente, por isso é necessário ajustar a concentração de várias proteases.Como a solubilidade do inibidor de protease em líquido é extremamente baixa, deve-se prestar atenção especial ao fato de que o inibidor de protease deve ser totalmente misturado no tampão para reduzir a precipitação do inibidor de protease.A Pepstantina A pode inibir proteases ácidas como pepsina, angiotensina, colagenase, catepsina D e quimosina.
Pepstatina A é um inibidor da catepsina d e e.Após as células HEK293 terem sido tratadas com diferentes concentrações de pepstatina A durante 24 horas, foi detectada a expressão de LC3Ⅱ e p62.Os resultados mostraram que a pepstatina A poderia aumentar significativamente a expressão de LC3Ⅱ e P62 (P< 0,05) de maneira dose-dependente.Foram utilizados 20 μg/ml de pepstatina A para tratar HEK293 em diferentes intervalos de tempo, e foram observados os efeitos de diferentes intervalos de tempo na expressão de LC3II e p62.Os resultados mostraram que a pepstatina A poderia regular positivamente a expressão de LC3II e p62 de uma maneira dependente do tempo.
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